免疫亲和柱使用几点注意
1、免疫亲和柱用前:提前将免疫亲和柱放置室温平衡30min;
2、样品提取环节:加入免疫亲和柱说明书规定提取液,振荡提取;
3、样品稀释环节:一般采用纯水稀释或者PBS稀释(也可以采用1.0%吐温20-PBS稀释),切记免疫亲和柱耐受甲醇的最大浓度为20%;耐受乙腈的最大浓度16%;(各不同品牌有机溶剂尤其是乙腈,耐受程度不同)
4、免疫亲和柱对于玉米而言,一般不考虑提取液的pH问题,但玉米副产物提取时,一定要考虑稀释后的pH,控制7.0左右;
5、免疫亲和柱样品淋洗环节:普通样品可采用20mL纯水去杂,复杂的玉米副产品,建议依次采用10mL0.1%吐温20-PBS、10mL10%甲醇-水、10mL水去杂;
6、关于免疫亲和柱净化时流速:坚持“两慢一快”原则。两慢指的是样品过柱慢,甲醇洗脱慢;一快指的是淋洗环节可以快。
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