黄曲霉免疫亲和柱
黄曲霉毒素B1(AFB1)是由黄曲霉、寄生曲霉等真菌产生的次生代谢产物,由于广泛分布于自然界中,且毒性强、理化性质稳定,世卫组织(WHO)的癌症研究机构将其列为Ⅰ类致癌物。欧盟对食物中AFB1的最低限量为2μg/kg,我国则为0.5~20μg/kg。
免疫学检测技术例如酶联免疫法(ELISA)、胶体金法(GICA)和时间分辨荧光免疫法(TRFIA),具有特异性强、操作简便、快捷等特点,在AFB1的定性和定量方面得到了广泛应用。这些技术基于抗原抗体的免疫竞争抑制反应,受基质影响大,因而对抗体原料的质量要求较高,需要有较高的纯度和活性。
抗真菌毒素单克隆抗体一般采用杂交瘤细胞的动物体内诱生法,制备的腹水抗体浓度高、活性强,缺点是抗体组分复杂,含大量杂蛋白。传统等电盐析法,虽能分离部分杂蛋白,但需要用透析膜除去溶液中的盐离子,使得操作时间长,无法实现大批量提取。
超滤是20世纪70年代发展起来的分离技术,不但可用于分离和浓缩不同分子量的大分子物质,还可用于脱盐;具有简便快捷、操作条件温和、适宜大规模处理、目标蛋白不易变性等优势,已在疫苗、血浆制品类、酶、发酵产品和抗体纯化等方面得到了成功应用,成为最具发展前景的生物制品分离纯化技术。
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